四种山药药理活性成分的比较研究

admin Post in 2013.12, 中医研究
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陈运中   陈俊彰,湖北中医药大学         430065

摘要:目的:对四种获得中华人民共和国“国家地理标志”保护的山药的四种活性成分进行测定,并比较其保健功能价值。方法:采用高效液相色谱法测定尿囊素,分光光度法测定薯蓣皂甙,分光光度法测定总多酚,水提醇沉重量法测定多糖,红外光谱法表征活性多糖。结果:铁棍山药、陈集山药、佛手山药和南阳山药的尿囊素含量分别为0.462±0.020、0.935±0.045、0.495±0.021和1.029±0.028(%);薯蓣皂甙含量分别为1.038±0.012、0.902±0.022、0.995±0.025和0.557±0.012(%);总多酚分别为0.110±0.006、0.084±0.004、0.101±0.004和0.105±0.006(mg/g);活性多糖含量分别为8.701±0.232、13.487±0.251、7.355±0.423和5.420±0.243(%)。结论:四种 “国家地理标志”保护的山药品种的药理活性成分含量都比较高,具有较高的保健功能价值,品种间有较大的差异。

关键词:山药,尿囊素,薯蓣皂甙,总多酚,活性多糖

Key words: Yam , allantoin,dioscin,polyphenol,active polysaccharides.

0  引言

山药(Dioscorea Opposita Thunb.)为百合目(Liliales),薯蓣科(Dioscoreaceae),薯蓣属(D. L.)植物薯蓣的俗称,是一年或多年生的缠绕性藤本植物。其根茎为可食部分,是中国国家卫生部公布的药食两用中药,药用山药代表是怀山药,主要产于河南省北部、山西省中南部具有较高的药用和滋补价值,为《中国药典》所收载。铁棍山药被誉为怀山药中的珍品。中医认为,山药具有健脾、补肺、固肾、益精等多种功效。

中国已有四个产地的山药申请了“国家地理标志”保护产品,分别是河南焦作温县的“铁棍山药”、山东省菏泽市陈集镇的“陈集山药”、湖北武穴的“佛手山药”和江西瑞昌市南阳乡的山药(以下分别简称“铁棍山药”、“陈集山药”、“佛手山药”和“南阳山药”)。本文以这四种山药为实验材料,通过测定四种山药中的四种药理活性成分,比较它们的保健功能品质,旨在为中国山药的开发研究提供理论依据。

1  实验材料与仪器

1.1 实验原料

铁棍山药,产地河南省焦作市温县;陈集山药,产地山东省菏泽市陈集镇;佛手山药,产地湖北省武穴市;南阳山药,产地江西瑞昌市南阳乡;均采购于当地。

1.2  实验试剂

尿囊素标准品,上海江莱生物科技有限公司。

薯蓣皂甙标准品,上海药谷药业有限公司。

没食子酸标准品,中国药品生物制品鉴定所。

甲醇(色谱纯),天津市科密欧化学试剂有限公司。

其它试剂均为分析纯。

1.3  实验仪器

可见分光光度计:V-1100上海美谱达仪器有限公司。

HPLC色谱仪:Waters1525-2998  Waters中国有限公司(美国)。液相色谱柱,Phenomenex Luna C18,Phenomenex公司(美国)。

傅里叶红外光谱仪:Nicoletis10  Thermo Scientific

2  实验方法

2.1 山药中的尿囊素的测定:

尿囊素标准品为标准,高效液相色谱法测定。色谱条件,色谱柱:Phenomenex Luna C18(250mm×4.6mm,5µm),Phenomenex公司(美国);流动相:甲醇-水(1:9,V/V);流速:0.5mL/min;检测波长:224nm。回归方程y=0.0005x+0.0907,R2=0.9917。

2.2 山药中薯蓣皂甙含量测定:

薯蓣皂甙标准品为标准品,采用乙醇回流提取法提取山药中的薯蓣皂甙,用可见分光光度法在波长544nm处测定其含量。

2.3  山药中总多酚的含量测定:

丙酮为溶剂回流提取山药中的总多酚,以没食子酸为标准品,用福林酚试剂显色,采用可见分光光度法在波长765nm处测定总多酚的含量。

2.4   山药中多糖的测定:

采用水提醇沉的工艺提取山药中的活性多糖,加入浓缩液体积7.5%的浓度3%的三氯乙酸溶液除蛋白,再次离心,取上清液,加入5倍体积的无水乙醇沉淀活性多糖,烘干,称重,计算山药的活性多糖含量。

2.5  山药中活性多糖的表征:溴化钾压片法红外光谱检测。

3.  结果

3.1 四种山药尿囊素的含量

如图1所示,铁棍山药、陈集山药、佛手山药和南阳山药的尿囊素含量分别为0.462±0.020、0.935±0.045、0.495±0.021和1.029±0.028(%),品种间变异系数为40.2%。其中南阳山药尿囊素含量最高。

图 1. 四种山药尿囊素含量对比

3.2四种山药薯蓣皂甙的含量

如图2所示,铁棍山药、陈集山药、佛手山药和南阳山药的薯蓣皂甙含量分别为1.038±0.012、0.902±0.022、0.995±0.025和0.557±0.012(%),品种间变异系数为39.0%。其中铁棍山药薯蓣皂甙含量最高。

 

图2 四种山药薯蓣皂甙含量对比

 

3.3四种山药总多酚的含量

如图3所示,铁棍山药、陈集山药、佛手山药和南阳山药总多酚分别为0.110±0.006、0.084±0.004、0.101±0.004和0.105±0.006(mg/g),品种间变异系数为10%。其中铁棍山药总多酚含量最高。

图3  四种山药总多酚含量对比

3.4四种山药活性多糖的含量

提取分离的山药活性多糖经溴化钾压片法红外光谱检测具有多糖特征吸收峰。红外光谱图见4,5,6,7。

 

图4  铁棍山药活性多糖红外吸收光谱    图5 陈集山药活性多糖红外吸收光谱

 

图6  佛手山药多糖红外吸收光谱         图7 南阳山药多糖红外吸收光谱

图8 四种山药活性多糖含量对比

 

 

 

 

四种山药多糖含量如图8所示,铁棍山药、陈集山药、佛手山药和南阳山药的活性多糖含量分别为8.701±0.232、13.487±0.251、7.355±0.423和5.420±0.243(%),品种间变异系数为38.1%。其中陈集山药活性多糖的含量最高。

 

 

4.  小结

四种“国家地理标志”山药品种中的药理活性成分,按含量由高到低依次是,活性多糖>薯蓣皂甙>尿囊素>总多酚。含量最高的是活性多糖。

活性多糖含量分别为,铁棍山药8.701±0.232、陈集山药13.487±0.251、佛手山药7.355±0.0423和南阳山药5.420±0.243(%),山药活性多糖含量由高到低依次是,陈集山药>铁棍山药>佛手山药>南阳山药。陈集山药的多糖含量是南阳山药多糖含量的2.48倍。

尿囊素含量分别为,铁棍山药0.462±0.020、陈集山药0.935±0.045、佛手山药0.495±0.021和南阳山药1.029±0.028(%),尿囊素含量由高到低依次是,南阳山药>陈集山药>佛手山药>铁棍山药。南阳山药的尿囊素含量是铁棍山药尿囊素含量的2.2倍。

薯蓣皂甙含量分别为,铁棍山药1.038±0.012、陈集山药0.902±0.022、佛手山药0.995±0.025和南阳山药0.557±0.012(%),薯蓣皂甙含量由高到低依次是,铁棍山药>佛手山药>陈集山药>南阳山药。铁棍山药的薯蓣皂甙是南阳山药薯蓣皂甙的1.86倍。

 

 

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