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辛迪是在波士顿长大的，她今年50岁了，在威尔斯利教书已25年，她一直忙忙碌碌，浑身充满了能量和热情去帮助周围的朋友。作为小学老师，她承受很大的压力，她需要对她的学生安全负责任，还要想办法让他们集中精神念书。在此同时，她还要照顾生病的家人。几星期前她突然出现呼吸困难的症状，在此同时她感到头脑发胀，有一种窒息感。她立即跑到急诊室对她的心肺检查了一番。所有检查结果均正常，但是她的血氧浓度波动很大，从98%可以降到67%，而且左右手的氧气度数还不一样，她的心脏和肺科专家告诉她心肺功能均正常。但当她的血氧降到87%时，她感到胸部发紧，呼吸困难，记忆力减退。一天她在波士顿开会，到傍晚时她的血氧浓度降到76%。另一天，她没上班，而且头一天晚上睡得很好，但是她右手指显示的氧气含量很低，左手指示98%，她不知所搓。

由于没有人明白为什么她的血氧波动这没大，她终于想试试针灸治疗。她的好朋友建议她和我讨论一下底氧的原因。我分析了她所有的症状和病史。她告诉我：她出生在波士顿的一家医院，她一生下来两侧肩膀的肌肉就比较弱，因此她的颈部肌肉很容易变紧，乃至痉挛。她今年50岁了，她虽然还有正常的月经，但她的卵巢功能和肾上腺功能已开始变弱，她的放松荷尔蒙，比如GABA，Serotonin，progesterone 已开始下降。这就是为什么有时候她感到被太多的责任压的透不过来气。她的抗压系统：下丘脑-垂体-肾上腺轴已不像她二十岁时那末强壮了。在更年期前后竟管雌激素和孕激素都在下降，但孕激素下降的比率要大得多，相对偏盛的雌激素使得神经系统对各种刺激变得特别敏感。很多妇女会有各种各样的异样感觉：麻木感，蚁行感和异常肌肉跳动。而且下降的雌激素使得肩部和颈部的肌肉变弱。如果她仍然做和以前同样的工作量，她的身体可能承受不了。针灸能强壮她的肾上腺和卵巢的功能，她的身体能产生更多的放松和抗压荷尔蒙。她的雌激素不会下降的太快，肌肉不会迅速的痿缩。

在开始第一次针灸治疗之前，我让她测一下氧气的浓度，她的血氧浓度浮动在70%和90%之间。我想起来在俄亥俄医学院做针灸研究时，如果让小婴儿趴着睡时，他们的血氧浓度迅速上升，心率会下降。如果辛迪的心脏和肺脏本身没有问题的话，当她全身放松时，氧气的浓度会迅速上升。辛迪趴在治疗床上，我在她的脖子和肩膀上扎了几针来放松她的肌肉，几分钟之内她的血氧浓度开始上升到98%，而且持续了50分钟。然后我在她的肩膀和脖子上用了10分钟的电针来强壮她的肌肉，在治疗后的几天内，她的血氧浓度一直保持在98%。这说明她的颈肩部肌肉紧张导致了她的血氧水平下降。为什么大多数人没有这个问题，因为辛迪生来肩部肌肉比较弱，而且她每日饮用大量咖啡，再加上她的神经系统现在特别敏感。一但她的肌肉紧张起来，她的神经反射使她的呼吸变浅，血氧开始下降，她变得更焦虑，呼吸会更浅，她会感觉到头脑不清醒。甚至有时她必需停下手中的活，深呼吸几分钟。

当一个有焦虑症的人与很多人呆在一个密闭的空间时，下降的氧气浓度能诱发他们的恐慌症：呼吸困难，心率加快，头脑一偏空百，他们通常想迅速逃离现场。海边和森林的氧气浓度比较高，有焦虑症的人会在这些地方很放松，很愉快。假如你没有时间去海边，你可以打开窗户，或在大楼外边做深呼吸，你会立刻全身放松，头脑清晰。最近的科学研究证实如果你每天结合主动深呼吸和放松运动，你甚至可以改变基因的表达。比如你天生有很敏感的交感神经系统， 通过长期练习放松深呼吸，你可以让你的交感神经系统变得不过于敏感，同时你可以使你的副交感神经变得更强壮。这样你的神经系统会处与比较平衡的状态。当你遇到紧急情况时，你可以镇定自如的应付，你的心脏不会跳的太快，你的呼吸不回变的太浅。当你处于一种放松状态时，你的消化系统会更健康，你的免疫功能会更强壮，你能避免许多种疾病，比如：心脏病，恶性肿瘤，自身免疫性疾病和各种炎症。这就是为什没当一个人吃的好，睡的好，而且处于一种放松壮态时，他（她）能健康长寿。基因只在长寿中起百分之三十的作用。通过改变我们的生活习惯，我们可以关闭坏的基因和让好基因开始表达。平衡是健康和快乐的重要因素。

艾亚婷¹; 胡镜清²; 彭锦³; 方锐^2,4; 徐倩¹王凌¹; 冯琳¹; 张松峰^2,5; 杨燕⁵; 陈亦辉⁵; 胡慧^1*

1 湖北中医药大学,武汉, China 430065

2中国中医科学院广安门医院中医临床研究方法国家中医药管理局重点研究室,北京, China 100053

3 中国中医科学院中医临床基础医学研究所,北京, China 100700

4 湖南中医药大学,长沙,410208; 5福建中医药大学,福州, China 350122

目的：构建基于网络平台的具有中医特色的社区中老年人的长期护理模式，实现此类人群的健康管理。方法：将中国中医科学院健康管理课题组和湖北中医药大学护理学院科研小组在湖北省武汉市某社区收集的调查资料双人双录入Epidata3.0软件后导入中医健康管理平台。受访者凭借唯一的登录名登录平台，可以查看并下载评估报告及护理方案，还可以根据症状的变化重新在线问卷答题，平台将根据受访者的症状及轻重程度给出评估报告和个性化调护方案。

结果：平台从食疗药膳，穴位按摩，刮痧，艾灸，拔罐，药枕，足浴，药浴，情志，运动，生活方式等方面对396例受访者进行护理指导和健康管理。

结论：基于网络平台的具有中医特色的社区中老年人的护理和健康管理模式可以提高中老年人自我护理和健康管理意识，值得进一步研究和推广。

关键词：网络平台；中老年人；辨证施护；健康管理；社区护理

[原文（英文）标题] The effect and potential mechanism of replenishing kidney-essence,removing phlegm therapy on CaMKII- α on hyperphos- phorylation for AD rat model.

[摘 要] 目的 观察补肾化痰法对AD模型大鼠CaMKII-α活性的影响并探讨其可能机制。方法 应用脑立体定向技术给大鼠BNM注射凝聚态Aβ_25-35＋IBO构建AD模型。注射2周后，高、中、低量组分别给大鼠该药水煎液灌胃；西药组用哈伯因混悬液灌胃；正常组、空白组、模型组均给予等容积的生理盐水灌胃。28天后采用原位杂交法检测海马神经元CaMKII-α水平的变化。结果  在正常大鼠的脑海马部位少见CaMKII-α免疫阳性表达，正常组与空白组无明显差异(p>0.05)，而在模型组可见大量的棕黄色CaMKII-α免疫阳性表达，与正常组相比，具有统计学差异（P<0.01）。西药组与模型组比较无差异(p>0.05)，中药中高量组阳性表达较模型组均有所减少（P<0.01）。低量组与模型组无差异(p>0.05)，但与西药组有一定差异（P<0.05）。结论  补肾化痰法可以可能通过抑制CaMKII-α的活性，降低Tau蛋白异常磷酸化水平，从而发挥其抗老年性痴呆的作用。

[关键词] 补肾化痰法；Alzheimer；钙/钙调素依赖的蛋白激酶II-α ；Tau蛋白

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以进行性记忆障碍和智能衰退

为主要临床特征的中枢神经系统退行性疾病，随着人口老龄化的日趋严重，AD已经成为危害老年人健康的主要疾病之一。AD患者的特征性病理改变包括神经原纤维缠结（Neurofibrillary tangle,NFT）、老年斑（Senile plaques ,SP）和颗粒空泡变性。NFT在神经元胞体内，由高度磷酸化的Tau蛋白聚集形成，其数目和AD的痴呆程度密切相关，因此有人认为Tau蛋白的过度磷酸化是AD 的核心病变^[1]。在几种Tau蛋白激酶中，钙/钙调素依赖的蛋白激酶II (calciurn/calmodulin-dependent protein kinase,CaMK II)- α与AD关系密切，在Tau蛋白过度磷酸化中起着重要作用^[2-3]，所以抑制CaMKII-α表达，降低Tau蛋白的过度磷酸化对防治AD有重要指导意义。

本病目前尚无特效的治疗方法，西医主要是对症治疗，药物价格昂贵，毒副作用较大，不能支持老年人用药的要求。中医药在延缓衰老以及衰老相关疾病的防治方面有着丰富的理论和实践经验，以其疗效较好、综合效益高、副作用少而显示了良好的前景。为此我们首先建立了大鼠AD模型，并采用原位杂交法检测海马神经元CaMKII-α水平的变化，同时观察补肾化痰法对AD模型大鼠CaMKII-α水平的影响，并用哈伯因混悬液作对照,旨在进一步探讨中药治疗AD的作用及机理所在。

1 材料

1.1 动物  15月龄Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重450±50g，由湖北省实验动物研究中心提供。

1.2 主要试剂    Aβ_25-35和IBO购于Sigma公司，CAMK-Ⅱ原位杂交试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。

1.3 主要仪器和设备  脑立体定位仪（北京硕林苑科技有限公司），H600透射电子显微镜（日本日立公司），倒置显微镜（CK2，奥林巴斯公司）。

1.4 药物  补肾化痰方由制首乌、石菖蒲、竹节参、茯苓、陈皮、半夏、白芥子等组成,购自湖北中医学院国医堂门诊部。中药水煎常圧浓缩，低、中、高剂量组分别制成相当于含生药0.5g/ml、1g/ml 和2g/ml的浓缩液，4℃冷藏备用。哈伯因,河南众生制药股份有限公司豫中制药厂,批号:060321

2 方法

2.1 实验分组  ①Aβ_25-35+IBO模型组（简称模型组）②假手术组（简称空白组）③正常组④哈伯因治疗组（简称西药组）⑤补肾化痰法高剂量组（简称高量组）⑥补肾化痰法中剂量组（简称中量组）⑦补肾化痰法低剂量组（简称低量组）

2.2  AD模型构建  参照本课题组前期已成功制作的复合AD大鼠模型^[4]方法造模。除正常组和空白组外，其它大鼠用 2％戊巴比妥钠（40mg/Kg）腹腔注射麻醉后，固定于脑立体定位仪上，颅顶正中切开暴露至颅骨，根据大鼠颅脑立体定位图谱，对基底核立体定位（位置:前囟后 3.8mm，中线旁开 2.5mm，深度 3mm），用牙科钻钻开颅骨，用 1μl 微型进样器注射针5min 内缓慢注入Aβ_25-35+IBO混合液 1µl，予以留针 10min。注射完毕后以局部软组织封闭针孔，缝合皮肤。术后给予青霉素钠盐 5 万单位肌注，每天一次，连续 3 天。

空白组在定位下给予大鼠Meynert基底核一次性注射 1μl 灭菌生理盐水。正常组大鼠不做任何处理。

2.3 给药 脑内注射2周后给药。给药量均按人与大鼠体表面积系数比确定，以临床人用药等效剂量做为中剂量，模型组、空白组、正常组给予生理盐水灌胃。西药组给予哈伯因混悬液灌胃。高量组、中量组、低量组分别给予补肾化痰方水煎液灌胃。均为1ml/100g·d，连续28天。

2.4 原位杂交法检测海马神经元CaMKII-α水平的变化 石蜡切片经常规脱蜡，水洗，在切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀），37℃或室温消化15min。用PBS洗3次，蒸馏水洗1次后固定。按每张切片20μl加预杂交液。恒温箱38-42℃杂交过夜，37℃左右水温的2×SSC洗涤5min×2次；37℃0.5×SSC洗涤15min×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15min×1次，滴加封闭液、生物素化鼠抗地高辛、SABC，用PBS洗5min×3次，再滴加生物素化过氧化物酶，用PBS洗后使用DAB显色试剂盒1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上，显色，酒精脱水，二甲苯透明，封片。

2.5 统计处理

所有计量检测结果以均数±标准差（ ）表示。采用SPSS FOR WINDOWS 15.0统计软件包统计分析。

3 结果 

实验结束，模型组、西药组和低、中量组分别死亡大鼠3、1、1、1只。原位杂交实验分析在正常大鼠的脑海马部位少见CaMKII-α免疫阳性表达，正常组与空白组无明显差异(p>0.05)，而在模型组可见大量的棕黄色CaMKII-α免疫阳性表达，与正常组相比，具有统计学差异（P<0.01）。西药组与模型组比较无差异(p>0.05)，中药中高量组阳性表达较模型组均有所减少（P<0.01）。低量组与模型组无差异(p>0.05)，但与西药组有一定差异（P<0.05）。中高剂量组之间无显著性差异(p>0.05)。

 补肾化痰法对大鼠脑组织CaMKII-αmRNA表达的影响（ ）

[注] 与正常组比　^△△P<0.01   与模型组比　^▲▲P<0.01

与对照组比   ^★P<0.05  ^★★P<0.01

4 讨论

AD属中医学的呆病、郁证、文痴等范畴，以本虚标实为主要特征，本虚在于肾的精气不足，标实在于痰浊，一方面肾虚为主的脏腑功能失调可导致痰浊的产生，即因虚致实，另一方面，痰浊为患又可影响气血津液的化生和运行，致本虚更甚，即因实而致虚，两者互为因果，形成恶性循环，以致病程缠绵，见症多端，所以本病应以补肾化痰为基本治法。

CaMK II 是一种多功能蛋白激酶，尤其在神经组织中含量丰富，在脑部某些区域如海马占总蛋白的2%。其在神经系统中发挥多种生理功能，广泛参与了基因的转录调节、神经递质的合成与释放、细胞骨架蛋白磷酸化、微管功能的调节、海马学习和记忆以及突触可塑性调节等多种生物学过程。越来越多的证据表明CaMK II-α在学习记忆过程中起重要作用。CaMK II-α基因敲除小鼠表现长程动作电位（long term potential,LTP）形成障碍以及海马依赖的空间任务完成障碍。^[5] 利用基因突变技术，发现αCaMKII^T286A小鼠空间记忆任务完成显著缺陷，^[6]  而且海马位置细胞（place cell）不稳定。

王月菊等^[7]研究发现CaMKII-α可能部分参与Tau蛋白过度磷酸化。Singh^[8]发现CaMKII-a参与Tau蛋白位点Ser262的磷酸化，此位点磷酸化后对于Tau蛋白从微管上解离尤其重要。有学者认为海马CA1区CaMK II-α活性增强可能促进Tau蛋白的异常磷酸化和PHF的形成。^[9]

本实验观察到，模型组大鼠海马组织CaMK II-α表达较正常组明显增加，补肾化痰法干预后，CaMK II-α的表达均较模型组有所减少，其中尤以高量组的表达减少较为明显，中、低量组则次之，提示补肾化痰法在一定剂量范围内也可通过调节CaMK II-α的表达减少AD模型大鼠Tau蛋白异常磷酸化水平。